細胞系的維持是培養工作重要內容。通過換液、傳代、再換液、再傳代和細胞凍存實現細胞系的維持，但對每一個細胞系來說都有其自身特點。
①細胞系檔案要記錄好，如組織來源，生物學特性，培養液要求、傳代、換液時間和規律，細胞的遺傳學標志，生長形態，常規病理染色的標本等。這些記錄對于保證細胞正常生長，保持細胞的一致、觀察長期體外培養后細胞特性的改變都有十分重要的意義。因此，無論在索取新細胞系還是自己建立新細胞系時都要盡可能把上述資料收集齊全。
②細胞系的傳代、換液一般都有自身的規律性，因此在維持傳代時要注意保持其穩定的規律性，這樣可以減少由于傳代時細胞密度的頻繁增減或換液時間的不規律而導致細胞生長特性發生改變，影響以后細胞實驗。
③多種細胞系維持傳代，要嚴格操作程序，以防細胞之間的交叉污染。傳代時所用器械要編號或做好標記，嚴禁交叉使用。
④每一種細胞系都應有充足的凍存儲備，防止由于培養細胞污染等因素造成細胞系的絕種；另外，二倍體細胞等有限細胞系如果暫時不用，凍存，以免傳代太多，造成細胞衰老或發生改變。
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